RENDIMIENTO DE PIMIENTO MORRÓN (Capsicum annuum L.) POR PODA FLORAL SELECTIVA Y DESPUNTE DE YEMAS LATERALES EN LA CUARTA BIFURCACIÓN
Palabras clave:
Solanum lycopersicum, hipocótilo, organogénesis, biobalística, Agrobacterium tumefaciens, plantas transgénicas de tomate.Resumen
En ingeniería genética, el tomate (jitomate) (Solanum lycopersicum) es un modelo importante para estudios poscosecha de frutos. Las transformaciones genéticas requieren protocolos para la organogénesis de los explantes transformados. Sin embargo, los protocolos actuales para la organogénesis del tomate son lentos, costosos y toman mucho tiempo. El objetivo de este estudio fue desarrollar un protocolo sencillo para la organogénesis del tomate cv. Rutgers. La hipótesis fue que la organogénesis del tomate a partir del hipocótilo, junto con un medio y método de transformación adecuados, disminuye el tiempo de regeneración necesario para obtener plantas transgénicas desarrolladas por completo. El diseño experimental incluyó la evaluación de la eficiencia de cinco medios de regeneración diferentes probados con dos tipos de explantes. La respuesta de la organogénesis del tejido calloso, de raíz y tallo se evaluó en todos los tratamientos. La transformación genética de los explantes de tomate se realizó mediante la infección con la cepa GV3101 de Agrobacterium tumefaciens. Además, se utilizó un equipo para introducir nanopartículas con vectores genéticos (pBI121 en este caso) en la célula vegetal (biobalística), por medio de helio a presión de 8.27 MPa (1200 psi), una presión de eyección de 6.20 MPa (900 libras) y una distancia de disparo de 6 y 9 cm. El tratamiento óptimo se obtuvo con la distancia de 9 cm junto con otros parámetros. La integración del vector binario se confirmó mediante la amplificación por PCR del gen npt-II y la tinción histoquímica GUS. El porcentaje más alto (41.6%) de regeneración de plantas de tomate se encontró en el medio AGK-1: 4.3 g L?1 de sales MS, 30 g L?1 de sacarosa, 0.5 mg mL?1 de AIA, 0.5 mg mL?1 de kinetina, 0.1 mg mL?1 de tiamina y 8 g L?1 de gelrita, evaluado en explantes de hipocótilo. En este medio, tallos y raíces se desarrollaron al mismo tiempo. Con la organogénesis directa a partir del hipocótilo obtuvimos un alto porcentaje de plantas de tomate transgénicas completas en 10 semanas, un tiempo relativamente corto en comparación con protocolos anteriores para la organogénesis en tomate. Estos resultados serán útiles en los experimentos de transformación genética para obtener líneas estables de tomates transgénicos.Descargas
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